Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний

На сегодняшний день наличие огромного количества новейших тестов для диагностики патологических состояний требует от клиницистов знаний не только основ клинической биохимии, но и новых алгоритмов лабораторной диагностики.

В представленных работах мы попытались помочь клиницистам подобрать правильный подход в лабораторной диагностике ряда патологических состояний, не по протоколам, а основываясь на рекомендациях Всемирной организации здравоохранения, новейших достижениях науки и клинической практике, собственных научно практических исследований.

Представленные в наших работах комбинации различных тестов дадут возможность врачам охарактеризовать патологические процессы в организме, выйти на правильные диагностические критерии и проследить ход лечения.

При Вашем интересе к работам, мы можем продолжить публикации.

Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний

Аутоиммунные заболевания (АИЗ) чаще развиваются у женщин, чем у мужчин, как правило, в молодом возрасте.

АИЗ развивается в тех случаях, когда в организме появляются антитела (АТ) или клоны реактивных Т-клеток, способные взаимодействовать с собственными антигенами и тем самым разрушать клетки и ткани несущие эти антигены. Возникший в результате АИЗ хронический процесс, приводит к долговременному повреждению тканей, структур, клеток, изменению регуляции биохимических процессов в клетках. Объясняется это тем, что аутоиммунная реакция постоянно поддерживается тканевыми антигенами. В качестве аутоантигенов могут быть различные соединения – белки, липиды, нуклеиновые кислоты, сахара, стероиды. Исследование и обнаружение в крови различных аутоантител имеет основное диагностическое значение для подтверждения АИЗ, контролю за лечением и прогнозированию.

Прежде чем перейти к диагностическим критериям АИЗ, кратко изложим основные механизмы развития АИЗ:

высокая инфицированность населения различными вирусами;
усиление факторов апоптоза;
изменение на молекулярном уровне основных биохимических процессов в клетке;
избыточная активация аутореактивных лимфоцитов;
генетическая предрасположенность.

Исходя из особенностей изменений биохимических механизмов в клетках и строятся основные диагностические критерии АИЗ, для которых характерно «ЗОЛОТОЕ» правило. В связи с отсутствием данных об абсолютной диагностической значимости раздельного определения антител их всегда следует определять в комплексе. Следовательно, только достаточное количество тестов может иметь диагностическое значение.

Далее мы приведем примеры правильного подбора тестов, обладающих высокой информативностью при различных АИЗ:

Диагностика аутоиммунных эндокринных заболеваний

АИЗ щитовидной железы: аутоиммунный тиреоидит, болезнь Грейвса, зоб Хашимото, атрофический тиреоидит, первичный тиреотоксикоз.

антитела к тиреоглобулину;
антитела к тиреопироксидазе;
антитела к рецепторам ТТГ;
антитела к микросамальной фракции тиреоцитов;
антитела к ткани щитовидной железы.

Поджелудочная железа (сахарный диабет 1-го типа).

Для этих целей используются три теста: антитела к инсулину, антитела к островковым клеткам поджелудочной железы, антитела к декарбоксилазе глютаминовой кислоты (GAD). Во время асимптомотического развития диабета, антитела к трем указанным антигенам могут определяться у пациентов за 7 лет до клинического проявления болезни.

Диагностика аутоиммунных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит (РА), смешанные заболевания соединительной ткани (СЗСТ), склеродермии, синдром Шегрена (СШ), дерматозы, полимиозиты, системная красная волчанка (СКВ), crest-синдром, прогрессирующий системный склероз (ПСС).

Для этих целей используются разновидности антиядерных антител, которые мы можем разделить на три группы:

истинные ядерные: двуспиральная ДНК, односпиральная ДНК, гистены, ядерная РНК;
экстрагируемые ядерные: Sm, RNP, Scl-70;
цитоплазмические: SS-A, SS-B, Jo-1.

Дополнительно можно ввести определение антител к центромере В и антитела к А-фодрину. Следовательно, если мы хотим диагностировать АИЗ соединительной ткани необходимо одновременно назначать следующие тесты:

Антитела к гистонам – CКВ/ЛКВ
Антитела к двуспиральной ДНК – СКВ
RNP – СКВ/СШ/СЗСТ
Sm – СКВ/ЛКВ
SS-A – СКВ/СШ/РА
SS-B – СКВ/СШ
Scl-70 – ПСС/Crest-синдром (склеродермия)
Jo-1 – полимиозит (миозит, дерматомиозит)
Антитела к центромере В – склеродермия, лимитированная и диффузная система)
Антитела к а-фодрину – ранняя диагностика синдрома Шегрена (СШ).

Для ревматологической диагностики используются антинуклеарные антитела (АНА), часть отмечена выше, которые назначаются следующими блоками: ANA-9-Line (9 тестов), Nukleo-9-Line (9 тестов).
Диагностика аутоиммунных гепатитов. В ранней диагностике аутоиммунных гепатитов, прогнозе и течения заболевания используется блок тестов (М2, SLA/LP, LKM, LC1, АГ-ASMA: F актин, миозин, десмин), объединенных общим термином: Liver-7-Line или Liver-9-Line. Еще раз предупреждаем, для точной диагностики необходимо назначать только полный блок тестов.
Диагностика воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта (болезнь Крона, целиакия, язвенный колит, злокачественная анемия).

Для диагностики, дифференциальной диагностики разработан высокоэффективный комплекс тестов – панель тестов, Gastro-5-Line, в которой одновременно определяются пять различных видов аутоантител, иммуноглобулины G и А антитела, а антигенами – мишенями являются внутренний фактор, париетальные клетки, глиадин, тканевая трансглутаминаза, маннан ( из бактерий)

Антитела к глиадину Ig A и IgG – целиакин.
Антитела к тканевой трансглутаминазе Ig A и IgG – целиакия
ASCA (антитела к Saccharomyсes cervisiae Ig A и IgG – дифференциальная диагностика болезни Крона и язвенного колита.
Антитела к внутреннему фактору – злокачественная анемия
Антитела к париетальным клеткам желудка – злокачественная анемия

Диагностика системных васкулитов и иммунологических заболеваний почек.

Первый комплект тестов ANCA -3-Line состоит из трех тестов:

первый, антитела к миелопероксидазе – васкулиты, микроскопический полиангит, ревматоидный артрит, СКВ;
второй, антитела к протеиназе-3-гранулематоз Вегенера;
третий, антитела к клубочковой базальной мембране - прогрессирующий гломерулонефрит без и с кровоизлиянием в легкие (синдром Гудпасчера).

В дополнении к указанным тестам необходимо использовать следующие определения ANCA (антинейтрофильные цитоплазматические антитела) антител: антитела к мембранному белку гранулоцитов и моноцитов (BPI) – хронические инфекционные болезни, болезнь Крона, язвенный колит, антитела к эластазе – элифизема, воспалительные ревматические болезни; антитела к катепсину G – воспалительные ревматические болезни, синдром Шегрена, синдром Фелти, СКВ; антитела к лизоциму – воспаление ЖКТ, язвенный колит; антитела к лактоферрину – первичный язвенный колит, склеротизирующий холангит.

Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС).

АФС проявляется венозными и/или артериальными тромбозами, различными формами акушерской патологии (привычное невынашивание беременности, тромбоцитопенией, а также другими разнообразными неврологическими, кожными, сердечно-сосудистыми, гематологическими нарушениями. Существуют два способа диагноститки АФС – упрощенный и необходимый, в которых используется разное количество тестов.

Упрощенный вариант обеспечен следующими тестами:

антитела к кардиолипинам (IgG и М),
волчаночный антикоагулянт,
антитела к в2-гликопротеину I (IgG и М).

Клинические параметры при назначении указанных тестов таковы: артериальный или венозный тромбоз различной локализации и/или привычное невынашивание беременности (спонтанные аборты, выкидыши, внутриутробная гибель плода).

Расширенный вариант, современными и эффективными в диагностике АФС являются следующие анализы:

антитела к кардиолипинам (IgG и М),
антитела к фосфатидной кислоте (IgG и М), фосфатидилхолину (IgG и М), фосфатидилэтаноламину (IgG и М),
антитела к фосфатидилсерину (IgG и М),
антитела к фосфатидилинозитам (IgG и М),
антитела к протромбину (IgG и М),
антитела к аннексину (IgG и М),
антитела к в-2-гликопротеину I (IgG и М),
волчаночный антикоагулянт (ВА).

Именно такая комбинация оптимальна в установлении диагноза АФС.

Диагностика аутоиммунных неврологических заболеваний.

Возможны следующие комбинации различных биохимических маркеров:

Антитела к Ни, Yo 1, Ri, М2, амфифизину – паранеопластический энцефалит
Олигоклональный IgG в ликворе и сыворотке демиелинизирующие поражения ЦНС.
Антитела к ганглиозидам Gm1, Gq1b, CD1b – демиелинизирующие поражения нервов
Антинуклеарный фактор, антинейтрофильные цитоплазматические антитела, антитела к кардиолипинам (IgG и М), криоглобулины – полиневриты
Антинуклеарный фактор, лайн-блот с определением Jo1, RNP, Mi2, Ки, Рм-Scl – полимеозит
Антитела к скелетным мышцам – миастения.

Автор статьи: д.м.н., профессор Слюсарь Н. Н.